Dark -Field Microscopic Analysis on the Blood of 1,006 Symptomatic Persons After Anti-COVID mRNA Injections from Pfizer/BioNtech or Moderna

Article Index

Turin, March 31, 2022

Report Concerning the Measures Performed with Scanning Electron Microscopy (SEM) Supplemented by Energy Dispersion Spectroscopy (EDS) on Blood Samples

  1. Purpose

On February 13, 2022 our laboratory received a request to carry out measures with scanning electron microscopy on two samples of blood. The analysis requested was conducted between February 14 and February 24, 2022 at the Electronic Microscopy Laboratory in the Department of Chemistry at the University of Turin located at Via Querello 15A. The request from the client was to identify structures with anomalous morphology compared to ones well-known in human blood. Specifically, the request from the client was based on their identification of the preceding structures with optical microscopy. Furthermore, once identified, it was requested to pursue the analysis of individual elements to their chemical composition. [3]

The slides to be analyzed were prepared immediately before the analysis in strips, and after drying, were treated with 1 nm of chromium. Placing a thin metal wire on the sample is necessary whenever non-conductive samples are analyzed that would [otherwise] prevent the acquisition of the images. The choice of chromium has been necessary as it has a very fine grain suitable for operating with sophisticated instruments such as the one used for the execution of the measures.

2.1 Principles of the Technology

The technology of scanning electron microscopy (SEM) uses an accelerated electron beam to produce a three dimensional image of a sample. This technique is indispensable with respect to characterizing materials and as such is useful in every area of research and of industry. The following briefly offers some facts that may be useful in understanding the origin of the images produced. The electronic bundle produced by a source is appropriately accelerated and crosses a series of electromagnetic lenses that is finally focused on the sample. When the electrons of the bundle hit the sample, shocks can take place that will give rise to a volume of interaction (having a droplet shape) from which the signals useful for producing images will escape by flourescence. The main type of signals that propagate and that are collected by appropriate detectors are:

  • Secondary electrons, they are electrons of the sample and after being hit by the band of electrons being expelled from the most superficial layers of the sample (a few dozen nanometers at most) bringing with them morphological and topographical information. The most exposed or very accentuated areas appear brighter in the images produced.
  • Retro-diffused, or back-scattered electrons, are electron bundles (more energetic than the secondary electrons) which, after interacting with the sample nuclei, are turned and expelled on the surface. The peculiarity of these signals, arriving from depths greater than the sample (1-2 microns), bring with them compositional information. Specifically, the presence of elements with a higher atomic number (heavy elements) appear more luminous and the opposite is true for the lighter ones.

UNIVERSITA OEGU STUDI Dl TORINO

ALMA UNIVERSITAS TAURINENSIS

LABORATORIO Dl MICROSCOPIA ELETTRONICA

DIPARTIMENTO Dl CHIMICA Universita' degli Studi di Torino Via Gioacchino Quarello ISA 1013S Torino

chimica

DOCUMENTAZIONE FOTOGRAFICA

In questo documcnto vicne riportata la reccolta fotografica rclativa ai due campioni di sanguc analizzati con lo tccniche

FE-SEM/EDS.

Cosa troverete in questo documento:

  • Per cgni «struttura» risccntrata sono state riportate diverse totogralie a diver si ingrandimenti. Le immagini riportate sono state ottenute con il detector per gli elettroni secondari (SE) che, fornendo informazioni di t po morfologico. sono risultate quelle piii utili peril nostro scopo diindaginc. In qualchc caso, quando ho ritenuto utile, ho riportatoanche quelle in BSE.
  • Per ogni struttura riscontrata sono state acquisite dclle rricroanalisi (EDS) sia puntuali sia come mappe di distribuzione. Qucste informazioni. oltrc alia visualizzazionc grafica dclle mappe, riportano anchc Ic perccntuali semi-quantitative degli dementi present! Tali microanalisi sono state acquisite in alcune zone dove e stato ritenuto piu opportune.
  • Le immagini qui riportate sono corredate di marker, unico dato essenziale che deve essere associato ad un'imnagine di mlcroscopia elettronica ma se si desiderasse consultare le Immagini «tall e quali come vengeno fornlte dallo strumentoa {cio£, contenenti tutti i perametri di acquisizione: voltaggio, ingrandinento, tipo di detector e cor rente di probe) queste si trovanc nell'allegato «Materiale di supporto*. Inoltre, nello stesso al legato potrete an che consultare le immagini acquisite in nodalita BSE (contrasto chimico) che pur non essendo fondamentali in questo caso, sono utile per averc un quadra completo doi campioni analizzati.

 

[English Translation of Plate 2]

This document shows the photographic collection relating to the two blood samples analyzed with the FE-SEM/DS techniques.

What you will find in this document:

  • For each "structure" encountered different photographs were reported with different magnifications. The images reported were obtained with the detector for secondary electrons (ES) which, providing morphological information, proved to be the most useful for our investigation purpose. In some cases, when it seemed useful, those in BSE [back-scattered electrons] were brought back.
  • For each structure encountered microanalyses with (EDS [Energy Dispersion Spectroscopy]) were acquired both at the site and as distribution maps. This information, in addition to the graphical visualization of the maps, also reports the semi-quantitative percentages of the elements present. These microanalyses have been acquired in some areas where it was considered more appropriate.
  • The images here are reported with only the essential data associated with each electron microscope image.

 

SUMMARY PHOTO DOCUMENTATION

Supplementary Materials

UNfVERSITA DEGLI STUDil Dl TORINO

ALMA UNIVIRSJTAS TAURINE MSJ&

LABORATORIO Dl MICROSCOPIA ELETTRONICA

chimica

DIPARTIMENTO Dl CHIMICA Universita' degli Studi di Torino Via Gioacchino Quarello 15A 10135 Torino

DOCUMENTAZIONE FOTOGRAFICA SOMMARIO

 

Campione di sangue soggetto 1

Globuli rossi.. pag. 3 Struttura 1 ... pag. 4 Struttura 2 ... pag. n Struttura 3 ... pag. 14 Struttura 4 ... pag. 17

 

B

Campione di sangue soeeetto 2

Globuli rossi

.. pag. 21

Struttura 5

.. pag. 22

Struttura 6

.. pag. 27

Struttura 7

.. pag. 28

 

<-X\

3

Quest'immagine, ottenuta a 20kx, mostra un agglomerato di globuli rossi ripiegati e la relativa microanalisi.

Carbonio, azoto ed ossigeno sono gli elementi principali. Gli altri elementi corrispondono ai componenti delvetrino. Tracce di zolfo e potassio sono anche state riscontrate.

This image obtained at 20 kx, shows an agglomeration of folded red blood cells and its micro analysis. Carbon, nitrogen and the oxygen are the main elements. The other elements correspond to the components of the slide. Traces of sulphur and potassium are also found.

Le immagini qui riportate sono state acquisite a 8kx e mostrano la presenza di un corpo allungato, ed attorcigliato su se stesso, di lunghezza superiore a 40 micron e spessore variabile di qualche micron.

Entrambe le immagini acquisite (SE&BSE) mettono in evidenza una struttura avente morfologia molto diversa da quella dei globuli.

Per poter studiare meglio la natura di questa struttura si e proceduto con I'acquisizione di immagini ad in grand imenti maggiori di diverse zone.

The images shown were acquired at 8 kx and show the presence of an elongated, twisted body over 40 microns in length and a variable thickness of a few microns.

Both images (SE&BSE) show a structure with a morphology very different from that of the globules. In order to better study the nature of this structure, we proceeded with the acquisition of images and higher magnifications of different areas.

 

Struttura 1 a mjcroar.aJki

Le mappe di distribuzione degli element! dell'area indagata mostrano come il carbonio sia I'elemento preponderante costituente il corpo allungato. La mappa del carbonio, in rosso, mostra infatti un accumulo di questo elemento su tutta la lunghezza. La presenza preponderante di questo elemento e evidente osservando come la mappa relativa sembra una copia della fotografia. Lo stesso non puo dirsi dell'ossigeno che, anche se presente, lo e in percentuali ben piu basse.

Ho riportato anche la mappa del silicio (costituente il vetrino) come riferimento, Un'informazione molto utile che puo esse re tratta guardando la mappa del silicio e che, in corrispondenza di una parte del corpo «estraneo» si osserva una zona scura (a destra). Questo indica che in quella zona, lo spessore del corpo e maggiore rispetto al resto.

 

c Ka1_2                                                        O Kctl                                                         Si Keel

5

The distribution maps of the elements in the investigated area show that carbon is the predominant element constituting the elongated body. The carbon map in red shows an accumulation of this element along the entire length. The predominant presence of this element is evident by observing how the relative map looks like a copy of the photograph. The same cannot be said of oxygen which, although present, is present in much lower percentages. We have also included the map of the silicon (constituent of the slide) for reference. A very useful piece of information that can be gleaned from looking at the silicon map is that there is a dark area (right) corresponding to a part of the "foreign body". That indicates, in this area, the greatest thickness than in the rest of the body.

 

The image on the right is an enlargement acquired at 70 kx of the area indicated in the box, where several overlapping and crumpled layers can be seen.

 

Ulteriore ingrandimento acquisito a 70kx di una zona diversa, indicata nel riquadro, dove si osserva nuovamente la presenza di piu strati sovrapposti .

In pagina successiva, la microanalisi confermera ulteriormente la natura, prevalentemente carboniosa della stessa.

7

Further magnification acquired at 70 kx of a different area, indicated in the box, where the presence of several overlapping layers is again observed.

On the next page, the micro-analysis will further confirm the predominantly carbonaceous nature of the material.

 

La mappa di distribuzione degli elementi evidenzia Laccumulo di carbonio nella zona corrispondente al corpo in questione.

La mappa del silicio mostra la componente principale del vetrino e puo essere utile come rife rim ento per le altre mappe.

C

2.5pm

The element distribution map shows the accumulation of carbon in the area corresponding to the body in question. The silicon map shows the main component of the slide and can be useful as a reference for the other maps.

 

La microanalisi puntuale eseguita sulla zona indicata ha messo in evidenza la presenza di carbonio al 63%. Sono anche stati evidenziati gli elementi costituenti del vetrino (silicio, ossigeno e sodio). Tracce di sali (cloruro di sodio e/o cloruro di potassio) sono anche state rilevate.

Alluminio e silicio possono essere dovuti alia presenza di qualche silicoalluminato (particelle piu chiare), componente del particolato atmosferico.

 

9

The micro point analysis performed on the indicated area revealed the presence of 63% carbon. The constituent elements of the slide (silicon, oxygen and sodium) were also highlighted. Traces of salts (sodium chloride and/or potassium chloride) were also detected.

Aluminium and silicon may be due to the presence of some silicoaluminate (lighter particles), component of atmospheric particulate matter

 

Finally, the image shown here was obtained at a high magnification, 280 kx, and shows the surface structure of the component film that resembles those presumably graphenic particles.

 

Queste immagini, acquisite a 9kx, riportano la seconda struttura riscontrata nel cam pi one 1.

Questa sembra mostrare un globulo rosso infilzato da una struttura di tipo «foglio stropicciato» e ripiegata.

Nella pagina successiva vengono riportate le microanalisi puntuali eseguite sia sulla parte «tondeggainte» sia sul corpo che lo attraversa in modo da valutare le eventuali differenze di composizione elementare anche se. Gia guardando I'immagine in BSE si pud Prevedere che la composizione sara molto simile (livelli di grigio molto simili).

BSE

11

These images obtained at 9 kx show the second structure found in sample 1. This seems to show a red blood cell impaled by a "crumpled sheet" and folded structure. The next page shows the precise micro analyzes performed both on the rounded part and on the body that passes through it in order to evaluate any differences in composition, even if already looking at the BSE image it can be expected that the composition will be very similar (levels of gray very similar).

 

Gli elementi costitutivi il globulo ed il corpo che lo attraversa sono gli stessi: carbon 10, azoto ed ossigeno. L'azoto sembra essere maggiormente presente nel globulo.

II silicio ed il sodio riscontrati nel film (spettro 25) appartengono ai componenti del vetrino che, in questo caso, essendo il film

mnlln cntfi la cnnn ct ti ri anoh

12

The constituent elements of the globule and the body that passes through it are the same, carbon, nitrogen and oxygen. Nitrogen appears to be more present in the blood cell. The silicon and sodium found in the film (spectrum 25) belong to the components of the slide, which in this case, being the film very thin, have been detected.

 

La mappa di distribuzione degli elementi

con term a

prevalente

presenza

carbomo con percentuah mmori di azoto ed

ossigeno

C Kal 2

luum

The distribution map of the elements confirms the prevalent presence of carbon with lower percentages of nitrogen and oxygen.

 

Questa terza struttura riscontrata nel campione 1 mostra due corpi aventi linee geometriche molto ben definite con angoli altrettanto definiti. Le dimensioni di queste strutture sono di qualche decina di micron.

In questo caso, riporto anche le foto in BSE in quanto utili per la visualizzazione dei confini della struttura.

Le immagini in SE mostrano i bordi molto luminosi (caratteristico di questo tipo di segnale) ad indicare che sono corpi con m aggiore rilievo topografico. Guardando entrambe le immagini si individua chiaramente come queste due strutture si stacchino dal vetrino di supporto facendo vedere molto bene i bordi regolari. Inoltre, la loro texture appare molto diversa dal resto del campione. Le immagini ad ingrandimenti maggiori, presenti nelle pagine successive, metteranno in evidenza questo aspetto.

This third structure found in sample 1 shows two bodies having very well defined geometric lines with equally defined angles. The dimensions of these structures are a few tens of microns. In this case, we also report the photos in BSE as they are useful for visualizing the boundaries of the structure. The SE images show very bright edges (characteristic of this type of signal) to indicate that they are bodies with greater topographical relief. Looking at both images it is clear how these two structures detach from the support slide showing the regular edges very well. Furthermore, their texture looks very different from the rest of the sample. The images at higher magnifications, present in the following images, will highlight this aspect.

BSE

14

 

Ulteriori dettagli della texture ad ingrandimento crescenti.

More details of the texture at increasing magnification

15

 

Struttura 3_Det

taglio a 38kx

Cl

 

 

 

II dettaglio ingrandito di uno di questi corpi mostra una struttura a film rugoso simile alle strutture di tipo grafenico.

BSE

16

The enlarged detail of one of these bodies shows a wrinkled film structure like presumably graphenic particles.

 

In questa pagina vengono riportate le immagini acquisite a Skxdi un'ulteriore struttura rilevata nel cam pi one 1.

In questo caso e molto utile riportare anche I'immagine in BSE che rende evidentegia da subito il fatto che la composizione chimica di questo film e fatta di elementi molto leggeri (contrasto scuro rispetto al fondo). Inoltre, si osserva come il film sia molto sottile in alcuni punti e le pieghe presenti siano molto ben visibili. II film awolge alcuni globuli rossi.

Le dimensioni sono di alcune decine di nanometri.

This page shows the images acquired at 6 kx of an additional structure detected in sample 1. In this case it is very useful to also report the image in BSE which makes it immediately evident that the chemical composition of this film is made of very light elements (dark contrast to the background). Furthermore, it is observed that the film is very thin in some points and the folds present are very clearly visible. The film surrounds some red blood cells. The dimensions are a few tens of nanometers.

 

Due ingrandimenti in zone diverse, ad un ingrandirnento maggiore 12kx, mostrano piu in dettaglio la struttura del film. Non appare continue ma composto da piu frammenti assemblati.

Two magnifications in different areas, at a magnification greater than 12 kx, show the structure of the film in more detail. It does not appear continuous but composed of several assembled fragments.

 

La mappa di distribuzione degli elementi conferma la prevalente presenza di carbonio con percentuali minori di azoto ed ossigeno.

19

The distribution map of the elements confirms the prevalent presence of carbon with lower percentages of nitrogen and oxygen.

 

Qui riporto i dati della microanalisi eseguita in due punti: uno che sembra piu spesso ed uno piu sottile.

N el la parte ripiegata, e quindi piu spessa (spettro 9) la presenza di silicio del vetrino e minore rispetto alio spettro 8 dove, essendo il film molto piu sottile, la percentuale di silicio rilevata e molto maggiore.

Questo conferma quanto gia detto nel caso della struttura 1 in pag.5.

 

tlectrcii linage 24

20

I report the data of the micro analysis performed in two points; one that looks thicker and one thinner. In the folded and therefore thicker part (spectrum 9) the presence of silicon in the slide is less than in spectrum 8, since the film is much thinner, the percentage of silicon is greater. This confirms what has already been said in the case of structure 1 on p. 5.

 

Immagine dei globuli rossi presenti nel campione 2.

I relativi dati della microanalisi mostrano la presenza di tracce di ferro uniformemente distribuiti.

 

c Kct1-2__________ O Ka1

Cl Ka1

Image of the red blood cells presents, in the sample 2, the relative data of the micro analysis and shows the presence of traces of iron uniformly distributed.

 

La prima struttura riscontrata nel secondo campione analizzato mostra un film di dimensioni notevoli (centinaia di micron) che awolge i globuli rossi che appaiono molto agglomerati tra di loro.

In questo caso, ho ritenuto utile riportare anche llmmagine in BSE per evidenziare come il film awolge i globuli in modo da non renderli piu rilevabili.

BSE

22

The first structure, found in the second sample analyzed, shows a film of considerable size (hundreds of microns) that surrounds the red blood cells which appears to be very agglomerated with each other. In this case, we found it useful to also bring the image back to BSE to highlight how the film wraps the blood cells so that they are no longer detectable.

 

La microanalisi eseguita in un punto del film, evidenzia una componente di prevalenza carboniosa. Inoltre sono anche state rilevate la presenza di ossigeno ed azoto in percentuali minori..

The micro analysis performed in one point of the film highlights a predominantly carbon component. In addition, the presence of oxygen and nitrogen in smaller percentages was also detected.

 

Quest'immagine mostra un altroframmento del film che, come una specie di veto, si estende per circa un centinaio di

micron. Essendo cosi lungo, non e stato possibile fotografarlo in un solo scatto

BSE

24

This image shows another fragment of the film which, like a veil, extends for about a hundred microns. Being so long, it wasn't possible to photograph it in one shot.

 

Dettaglio ingrandito del film con le sue pieghe dove si conferma la diversa natura del film rispetto ai globuli

25

Enlarged detail of the film with its folds where the different nature of the film with respect to the globules is confirmed.

 

Su un'immagine a basso ingrandimento (circa lkx) si e cercato di misura re la lunghezza del film utilizzando il software dello strumento. Come si osserva, la misura e approssimativa (in difetto) in quanto il film non e steso ma un po' ripiegato ed inoltre si tratta di piuframmenti collegati. La misura complessiva supera i 200 micron

26

On a low magnification image (about 1 kx) an attempt was made to measure the length using the instrument software. As you can see, the measure is approximate (in default) as the film is not stretched but a little folded and moreover it is more connected fragments. The overall measurement exceeds 200 microns.

 

La seconda struttura riscontrata sul campione 2 mostra un film di circa 30 micron che awolge dci globuli rossi

Come si evidenzia da entrambe le immagmi, il film appare molto sottile e formato da diversi frammenti assemblati e ripiegati

B5E

10 |im

The second structure detected on sample 2 shows a film of about 30 microns that surrounds red blood cells. As evidenced by both images, the film appears very thin and made up of several assembled and folded fragments

 

L'im magine centrale mostra un dettaglio ingrandito a 36kx dell'area del riquadro del film.

Si osserva come il film appare composto da diversi strati assemblati. Non si tratta di un film continuo.

La microanalisi dell'area ingrandita conferma ancora una volta la presenza di carbonio, ossigeno ed azoto come componenti principali. II fatto che il silicio del vetrino sia stato rilevato (al voltaggio utilizzato 5keV) ci

The central image shows an enlarged 30 kx detail of the film frame area. It is observed how the film appears to be composed of several assembled layers. This is not a continuous film. The micro analysis of the enlarged area once again confirms the presence of carbon, oxygen and nitrogen as main components. The fact that the silicon of the slide has been detected (at the voltage used 5kev) gives us information that the film is very thin

 

l°agglomerati_Jreccia giaita: mostra strutture globulari formati da nanoparticelle che, visto il diverso livello di luminosita nelhimmagine BSE, avranno composizione chimica diversa da quella dei globuli.

2°agglomerato_freccia rosso: Mostra una specie di melma che ingloba delle nanoparticelle incastrate nel globulo. In questo caso il livello di contrasto dell'immagine BSE ci suggerisce che la composizione chimica non sara molto diversa da quella dei globuli

These pages show the images of a red blood cell in which two types of different agglomerates are stuck:

1st aggolmerate-yellow arrow: shows globular structures formed by nano particles which, given the different level of brightness in the BSE image, will have a chemical composition different from that of red blood cells.

2nd agglomerate-red arrow: shows a kind of slime that incorporates nano particles stuck in the globule. In this acso the contrast level of the BSE image suggests that the composition will not be very different from that of the blood cells.

 

Dettaglio ingrandito a 175kx degli agglomerati della parte superiore.

Le dimensioni degli agglomerati a destra sono di circa 200 nm e sono chiaramente composti da particelle di livello nanometrico (25-30 nm)

30

Detail enlarged to 175 kx of the agglomerations of the upper part.

The dimensions of the agglomerates on the right are about 200nm and are clarifications composed of particles at the nanometer level (25-30 nm).

 

Gli agglomerati di nanoparticelle della parte superiore (freccia gialla) sono agglomerati di ossido di ferro. Le mappe del ferro e dell'ossigeno mostrano degli accumuli in corrispondenza dell'agglomerato quindij'identificazione e certa.

Diversa e la situazione per Tagglomerato a fianco {freccia rossa) che, come si evince dalle mappe, sembra avere composizione carboniosa.

Fe Lai,2

0 Kal

500nm

5QQnm

C Km 2

The agglomerates of nanoparticles in the upper part (yellow arrow) are agglomerates of iron oxide. The iron and oxygen maps show accumulations in correspondence with the agglomeration so the identification is certain. The situation of the adjacent agglomeration is different, which, as can be seen from the maps, seems to have a carbonaceous composition.

 

Osservando piu da vicino I'agglomerato in basso, si evidenzia un blocco di dimensioni di qualche centinaia di nanometri dall'aspetto compatto avente composizione elementare analoga aH'agglomerato riportato in pagina precedente: ferro ed ossigeno.

Le mappe di distribuzione degli elementi ci consentono di dire che si tratta, anche in questo caso, di ossido di ferro .

E c. .ton

Observing the agglomerate at the bottom, a block of a few hundred nanometers dimensions is highlighted, with an elemental composition similar to the agglomerate shown on the previous page: iron and oxygen. The distribution maps of the elements allow us to say that it is iron oxide.

 

COMMENTI FINALI

In seguito a vostra richiesta, sono state condotte le misure con la tecnica FE-SEM/EDS su due cam pioni di sangue.

Gli strisci su vetrino sono stati preparati prima delLesecuzione delle analisi e, appena asciutti, sono stati metallizzati con 1 nm di cromo.

Ogni campione analizzato e stato osservato in modo random fino al ritrovamento di strutture aventi morfologie «insolite» rispetto a quelle attese nel sangue umano. Durante la fase di identificazione, la scrivente e stata guidata dal com mittente nella scelta delle strutture dall'aspetto interessante che richiedevano un approfondimento e caratterizzazione.

Sono state riscontrate diverse «strutture» e, per ognuna di queste,si e proceduto acquisendo immagini a diversi ingrandimenti ed utilizzando i tre detector di cui e corredato il nostro strum ento;

  • Detector per elettroni secondari (SE)
  • Detector per elettroni retrodiffusi (BSE)
  • Detector per raggi X (EDS)

Le caratteristiche dei singoli segnali sono state descritte nella relazione tecnica a cui e allegato il presente report fotografico.

Sono state riscontrate strutture molto simili tra i due campioni, tranne per la struttura 7 (agglomerati di ossido di ferro) che e stata riscontrata solo per il campione 2.

La morfologia delle «strutture?> maggiormente riscontrate puo essere assimilabile a strutture di tipo grafenico: film sottili ripiegati e/o stropicciati simili ad un velo. I film appaiono sovrapposti ed agglomerati, talvolta sembrano assem blati gli uni agli altri ed in altri casi attorcigliati su se stessi. Le dimensioni riscontrate sono dell'ordine delle decine-centinaia di micron ma, essendo questi film visibilmente ripiegati, si tratta di misure approssimative (per difetto).

Per quanto riguarda la composizione chimica delle «strutture» riscontrate, queste hanno evidenziato una componente carboniosa prevalente accompagnata da percentuali ben piu basse di ossigeno ed azoto tranne per la struttura 7 che, come citato sopra, era di natura completamente diversa: ferro ed ossigeno.

Un aspetto importante da sottolineare e che quando si ha a che fare con campioni composti da elementi leggeri present! in una matrice avente composizione simile, come in questo caso, I'analisi elementare rappresenta una fase molto delicata delLindagine.

Durante questo lavoro, infatti, sono state raccolte il maggior numero di informazioni possibili, sfruttando tutti i mezzi a disposizione, per consentire al com mittente di poter comprendere al meglio i campioni in questione.

33

 

Following your request, measurements were carried out with the FE-SEM / EDS technique on two blood samples.

The drops on the slide were prepared before carrying out the analyzes, and as soon as they were dry, they were metallized with 1 nm of chromium.

Each analyzed sample was observed randomly until structures with "unusual" morphologies compared to those expected in human blood were found. During the identification phase, the writer was guided by the client in the choice of structures with an interesting aspect that required in-depth analysis and characterization.

Different structures were found and for each of these we proceeded by acquiring images at different magnifications and using the three detectors that our instrument is equipped with:

  • Secondary electron detector (SE)
  • Detector for retro scattered electrons (BSE)
  • X-ray detector (EDS)

The characteristics of the individual signals have been described in the technical report to which this photographic report is attached.

Very similar structures were found between the two samples except for figure 7 (iron oxide agglomerates) which was found only for sample 2.

The morphology for the most commonly encountered structures can be assimilated to structures presumably graphenic folded and / or wrinkled thin films similar to a veil. The films appear superimposed and agglomerated, sometimes they seem assembled to each other and in other cases twisted on themselves. The dimensions found are of the order of tens-hundreds of microns but, as these films are visibly folded, these are approximate measures (by default).

As regards the chemical composition of the structures found, these showed a prevalent carbon component accompanied by much lower percentages of oxygen and nitrogen except for structure 7 which, as mentioned above, was of a completely different nature: iron and oxygen.

An important aspect to underline is that when dealing with samples composed of light elements present in a matrix having a similar composition, as in this case, the elemental analysis becomes a very delicate phase of the investigation.

During this work, in fact, as much information as possible was collected, exploiting all the means available, to allow the client to better understand the samples in question.

 

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[1] The scanning electron miccroscopy (SEM) analysis with back-scattered electron (BSE) detection, secondary electron (SE) detection, and energy dispersive spectroscopy (EDS) of the blood of two subjects (Cases No. 3 and No. 4), performed by the Electron Microscopy Laboratory, Department of Chemistry, of the University of Turin is to be found in the ANNEX.

[2] For qualified individuals, more information can be obtained by writing directly to the corresponding author.

[3]    Analytical Methodology

 

https://ijvtpr.com/index.php/IJVTPR/article/view/47/80


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